在細(xì)胞生物學(xué)、肝臟疾病機(jī)制研究等領(lǐng)域，高質(zhì)量的小鼠肝臟單細(xì)胞懸液是開展后續(xù)流式分析、單細(xì)胞測(cè)序、細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn)的核心前提。傳統(tǒng)手動(dòng)制備方法常面臨諸多難題：消化酶作用不均導(dǎo)致細(xì)胞解離不徹底，反復(fù)操作中細(xì)胞活性易受溫度影響下降，且人工研磨、過濾步驟繁瑣，難以保證批次間的一致性。這些問題不僅拖慢實(shí)驗(yàn)進(jìn)度，還可能因樣本質(zhì)量不穩(wěn)定影響后續(xù)檢測(cè)數(shù)據(jù)的可靠性。而上海凈信單細(xì)胞懸液制備儀憑借標(biāo)準(zhǔn)化程序控制、精準(zhǔn)溫控及自動(dòng)化操作，為小鼠肝臟單細(xì)胞懸液制備提供了穩(wěn)定高效的解決方案，有效規(guī)避傳統(tǒng)方法的痛點(diǎn)。
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>小鼠肝臟制備成單細(xì)胞懸液，為后續(xù)流式細(xì)胞分析、單細(xì)胞測(cè)序、細(xì)胞功能檢測(cè)等實(shí)驗(yàn)提供高活性、高純度的單細(xì)胞樣本，保障實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性與重復(fù)性。
實(shí)驗(yàn)選用儀器：
單細(xì)胞懸液制備儀 JX-CKSM-4WK-B
實(shí)驗(yàn)步驟：
1、連接儀器電源，打開開關(guān)，選好肝臟程序以備用。
2、消化酶和終止液提前用流動(dòng)自來(lái)水解凍，讓其混合更加均勻。
3、小鼠斷頸處死后，取出肝臟部，放入有PBS的培養(yǎng)皿中，放在冰上。
將選取的肝臟組織用PBS洗滌后，用眼科剪剪碎、放入2ml消化管中，加入1ml左右消化酶。
5、放到模塊上，選擇對(duì)應(yīng)程序，點(diǎn)擊運(yùn)行開始。
6、時(shí)間結(jié)束后儀器自動(dòng)停止。
7、用70um濾網(wǎng)過濾，加入終止液終止消化(消化液：終止液=1：1)
過濾后的懸液放到離心機(jī)上重懸、重懸后棄掉上清，加入2ml裂紅溶液(200ulFBS)，冰上裂紅(3-5分鐘)，然后加入500ulPBS+1ml碎片去除劑，離心后棄上清，然后洗細(xì)胞兩次。
最后加入少量無(wú)菌PBS打散混勻底部沉淀細(xì)胞，即可得到單細(xì)胞懸液。
9、OAPI進(jìn)行染色，細(xì)胞計(jì)數(shù)儀看結(jié)果。
細(xì)胞計(jì)數(shù)儀結(jié)果圖
注意事項(xiàng)：
1、單細(xì)胞試劑盒要在-20℃低溫保存，使用時(shí)提前拿出來(lái)用涼水解凍，切記用溫?zé)崴?/span>
2、注意不要清洗單細(xì)胞懸液次數(shù)或時(shí)間太長(zhǎng)，導(dǎo)致細(xì)胞損失。
3、上海凈信單細(xì)胞懸液制備儀讓肝臟樣本處理更省心
從本次小鼠肝臟單細(xì)胞懸液制備實(shí)驗(yàn)來(lái)看，上海凈信單細(xì)胞懸液制備儀的優(yōu)勢(shì)尤為突出。相比傳統(tǒng)手動(dòng)操作，儀器預(yù)設(shè)的肝臟專屬程序省去了反復(fù)調(diào)試參數(shù)的麻煩，操作人員只需按步驟放置樣本、啟動(dòng)程序，即可實(shí)現(xiàn)消化酶的精準(zhǔn)作用 —— 避免了人工控制消化時(shí)間、溫度導(dǎo)致的解離過度或不徹底問題。實(shí)驗(yàn)中，從組織剪碎到儀器自動(dòng)停止消化僅需常規(guī)步驟時(shí)長(zhǎng)，且全程無(wú)需頻繁轉(zhuǎn)移樣本，最大程度減少了細(xì)胞在室溫下暴露的時(shí)間，為后續(xù)裂紅、清洗步驟保留了更多活細(xì)胞。
后續(xù)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀結(jié)果也印證了儀器的可靠性：制備的單細(xì)胞懸液活率穩(wěn)定，細(xì)胞分散均勻，無(wú)明顯組織碎片殘留，完全滿足 OAPI 染色及后續(xù)實(shí)驗(yàn)的要求。尤其值得一提的是，儀器操作門檻低，即使是剛接觸樣本制備的實(shí)驗(yàn)人員，按照流程也能快速上手，有效降低了因操作經(jīng)驗(yàn)差異導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)誤差。
對(duì)于需要頻繁開展小鼠肝臟相關(guān)研究的實(shí)驗(yàn)室來(lái)說(shuō)，上海凈信單細(xì)胞懸液制備儀不僅是提升實(shí)驗(yàn)效率的 “好幫手”，更是保障樣本質(zhì)量穩(wěn)定性的 “定心丸”。它解決了傳統(tǒng)方法中 “耗時(shí)、費(fèi)力、結(jié)果不穩(wěn)定” 的核心痛點(diǎn)，讓科研人員能將更多精力投入到后續(xù)的數(shù)據(jù)分析與機(jī)制探索中，為肝臟領(lǐng)域的研究提供了堅(jiān)實(shí)的樣本制備支持。
