實(shí)驗(yàn)背景:在肝臟細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中,相信很多科研人都有過這樣的困擾:費(fèi)盡心力分離的肝細(xì)胞活率上不去,未灌流的組織處理步驟繁瑣還易損傷細(xì)胞,好不容易得到的單細(xì)胞懸液卻達(dá)不到實(shí)驗(yàn)要求,而一款靠譜的肝臟灌流儀,恰恰能解決這些痛點(diǎn)。

我們以小鼠肝臟單細(xì)胞懸液制備實(shí)驗(yàn)為例,做了一組灌流與未灌流的對比測試,結(jié)果讓人眼前一亮:未灌流肝臟細(xì)胞活率 92.69%,經(jīng)灌流儀處理后的肝臟細(xì)胞活率直接提升至 97.78%,不僅活率顯著提高,還省去了裂紅裂解等繁瑣步驟,實(shí)驗(yàn)效率和細(xì)胞質(zhì)量雙提升。這款灌流儀,已然成為肝臟細(xì)胞研究的 “效率神器”。

實(shí)驗(yàn)中我們使用灌流儀搭配預(yù)冷 PBS 對肝臟進(jìn)行灌注處理,其模擬體內(nèi)生理環(huán)境的流體動(dòng)力學(xué)設(shè)計(jì),能溫和地疏通肝臟組織微循環(huán),減少細(xì)胞在后續(xù)消化、分離中的損傷。更關(guān)鍵的是,經(jīng)灌流儀處理后的肝臟,無需裂紅裂解步驟,直接消化過濾即可得到高質(zhì)量單細(xì)胞懸液,一步省去冰上裂解、多次清洗的繁瑣,大幅縮短實(shí)驗(yàn)周期,還能避免操作過程中人為因素帶來的實(shí)驗(yàn)誤差。
硬核產(chǎn)品特點(diǎn),造就實(shí)驗(yàn)好幫手
1.精準(zhǔn)控流控壓,模擬體內(nèi)生理環(huán)境
溫和疏通組織微循環(huán),避免因灌注力度不當(dāng)造成的細(xì)胞損傷,從源頭保障細(xì)胞活性。
2.專屬實(shí)驗(yàn)程序,操作簡單易上手
內(nèi)置定制化肝臟灌流專屬程序,開機(jī)后一鍵選擇即可啟用,無需繁瑣參數(shù)調(diào)試,新手也能快速掌握操作。
3.輕量化設(shè)計(jì),實(shí)驗(yàn)室適配性強(qiáng)
搭配單細(xì)胞懸液制備儀,可靈活放置于各類實(shí)驗(yàn)室操作環(huán)境。灌注管路采用快接式設(shè)計(jì),拆卸、清洗、更換便捷,且能有效避免管路污染,滿足實(shí)驗(yàn)無菌要求。
4.兼容性強(qiáng),適配多種實(shí)驗(yàn)場景
不僅適用于正常小鼠肝臟的灌流處理,在脂肪肝、肝硬化等病變肝臟組織的細(xì)胞分離實(shí)驗(yàn)中也能穩(wěn)定發(fā)揮作。
實(shí)驗(yàn)案例:
1、連接儀器電源,打開開關(guān),選好肝臟程序以備用。
2、消化酶和終止液提前用流動(dòng)自來水解凍,讓其混合更加均勻。
3、小鼠斷頸處死后,取出肝臟部,放入有培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中,放在冰上。

4、將選取的肝臟組織,分為2份,用培養(yǎng)基洗滌后,1號未灌流,2號放在灌流儀上,用預(yù)冷PBS進(jìn)行灌流。
5、1號和2號肝臟,放入消化管中,用眼科剪剪碎、加入消化酶。放到儀器上,安裝加熱套,選擇對應(yīng)程序,點(diǎn)擊運(yùn)行開始。

6、時(shí)間結(jié)束后儀器自動(dòng)停止,中途可暫停查看。
7、用70um濾網(wǎng)過濾,加入終止液終止消化(消化液:終止液=1:1)
8、過濾后的懸液放到離心機(jī)上重懸、重懸后棄掉上清,未灌流的1號肝臟,加入3ml裂紅溶液,冰上裂解(5分鐘),然后離心棄上清,清洗細(xì)胞兩次。灌流的2號肝臟無需此步驟。
9、使用去碎片劑,去除碎片,最后加入少量1640培養(yǎng)基打散混勻底部沉淀細(xì)胞,即可得到單細(xì)胞懸液。

10、臺(tái)盼藍(lán)進(jìn)行染色,細(xì)胞計(jì)數(shù)儀看結(jié)果。

細(xì)胞計(jì)數(shù)儀結(jié)果圖
從結(jié)果看:未灌流的肝臟活率為92.69%;灌流的肝臟活率為97.78%;灌流儀能顯著提高肝臟細(xì)胞懸液的活率。
除了直觀的活率提升和步驟簡化,灌流儀的優(yōu)勢還體現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定性和可重復(fù)性上。傳統(tǒng)手工灌流依賴操作人員的經(jīng)驗(yàn),不同人操作的灌注速度、壓力難以統(tǒng)一,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果波動(dòng)大;而專業(yè)肝臟灌流儀配備標(biāo)準(zhǔn)化的程序設(shè)置,可精準(zhǔn)調(diào)控各項(xiàng)參數(shù),無論是新手還是資深科研人員,都能輕松操作,獲得一致的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
在生命科學(xué)研究高速發(fā)展的當(dāng)下,實(shí)驗(yàn)工具的升級直接決定了研究的效率和深度。這款肝臟灌流儀憑借精準(zhǔn)的性能設(shè)計(jì)、便捷的操作體驗(yàn)和廣泛的適配性,不僅能顯著提升肝細(xì)胞活率,簡化實(shí)驗(yàn)步驟,更能為肝臟生理病理研究、細(xì)胞治療、新藥研發(fā)等領(lǐng)域提供高質(zhì)量的單細(xì)胞樣本支撐。

